Sameindagreining og nákvæmni krabbameinsfræði: Vefjamagnsþröskuldar og lágmarksmælikröfur

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/breast-biopsy/about/pac-20384812

Hugmyndafræði nútíma nákvæmni krabbameinslækninga hefur í grundvallaratriðum umbreytt krabbameinsmeðferð frá reynslu krabbameinslyfjameðferð í einstaklingsmiðaða, erfðafræðilega stýrða markvissa meðferð og ónæmismeðferð. Miðpunktur þessarar byltingarkenndu breytingar er áreiðanleg erfðafræðileg sniðgreining á æxlum, sem greinir stökkbreytingar sem geta virkað, spáir fyrir um lyfjanæmi og lagskiptir horfur sjúklinga. Í þessu samhengi vaknar mikilvæg tæknileg spurning fyrir krabbameinslækna, meinafræðinga og íhlutunarlækna: hvaða lágmarks nálarmælir getur uppskorið nægilega hágæða vefja- og kjarnsýruafrakstur til að styðja við öflugar sameindaprófanir? Ólíkt hefðbundinni formfræðilegri greiningu sem krefst aðeins sýnilegrar vefjabyggingar, krefjast sameindagreiningar strangar þröskuldar fyrir æxlisfrumu, kjarnsýruhreinleika og sýnisrúmmál. Kaliberið ávefjasýninál táknar því ekki lengur aðeins verklagsbreytu, heldur þjónar hún sem afgerandi ákvörðunarvaldi um réttmæti sameindagreiningar í neðri straumnum og síðari meðferðarraðgreiningu.

Núverandi almennar krabbameinsfræðilegar sameindagreiningar, þar á meðal næstu-kynslóðaröðun (NGS), flúrljómun in situ blending (FISH) og fjölgena forspárpróf eins og Oncotype DX, setja strangar og staðlaðar kröfur um vefgæði og rúmmál. Þessir sameindavettvangar með mikilli-nákvæmni treysta á ósnortið,-hreint DNA og RNA sem eru dregin úr lífvænlegum æxlisfrumum til að greina stökkbreytingar, mögnun, úrfellingar og óeðlilegt tjáningarsnið nákvæmlega. Klínískt staðfest 14G kjarnanálar vefjasýnissýni gefa um það bil 10–20 mm³ vefjamagn í hverjum kjarna, sem inniheldur milljónir lífvænlegra æxlis- og stromalfrumna. Þessi gnægð frumna gerir kleift að draga úr kjarnsýru á -mikrógrammastigi, sem uppfyllir að fullu inntakskröfur flestra fjölgena spjaldprófa í atvinnuskyni og alhliða erfðafræðilega prófílgreiningu. Aftur á móti skilar 18G nál, algengur valkostur fyrir hefðbundna formfræðilega vefjasýni, aðeins 50% til 60% af rúmmáli vefja sem fæst úr 14G kjarna. Þó að þetta minnkaða rúmmál gæti dugað fyrir venjulega sjúklega vélritun í algengum-frumumæxlum, stendur það frammi fyrir áberandi takmörkunum í krefjandi klínískum aðstæðum.

Paucicellular æxli, þ.mt ductal carcinoma in situ (DCIS) og leifar af sárum eftir nýviðbótarmeðferð með krabbameinslyfjum, valda verulegum áskorunum við smá-vefjasýnissýni. Þessar meinsemdir einkennast af dreifðri æxlisfrumudreifingu, víðtæku trefjablóði og tíðum drepsvæðum. Lítið -magn 18G sýni innihalda oft of mikinn stromalvef, bólgufrumur eða drepandi rusl í stað lífvænlegra æxlishluta. Þetta vandamál leiðir til ófullnægjandi kjarnsýrustyrks, alvarlegrar DNA sundrungar eða rangar-neikvæðar sameindaniðurstöður vegna lítillar æxlisfrumu. Í sérstökum tilfellum veldur ófullnægjandi sýnatöku bilun í greiningu, sem krefst endurtekinna ífarandi vefjasýnisaðgerða og seinkar ákjósanlegri meðferðartíma. Að auki eru lítil-fín-nálfrumusýni viðkvæm fyrir blóðfrumumengun og truflunum á frumurusli, sem skerðir enn frekar áreiðanleika og endurgerðanleika erfðafræðilegra gagna, sem gerir þau óhæf til{11}}staðlaðrar nákvæmni sameindagreiningar.

Þó fljótandi vefjasýnistækni, sem greinir æxlis-DNA í blóðrás í útlægum blóði, hafi þróast hratt á undanförnum árum og veitir ó-ífarandi hjálpargreiningaraðferð, er vefjasýni úr föstu æxli enn óbætanlegt í nákvæmri krabbameinsfræði. Vökvasýni getur ekki endurspeglað byggingareiginleika æxlisvefs, misleitni í æxli og staðbundið meinafræðilegt ástand, sem eru nauðsynleg fyrir nákvæma sameindaundirgerð. Fyrir sjúklinga með langt gengið brjóstakrabbamein og önnur illkynja æxli er kerfisbundin greining á PD-L1 tjáningarstöðu, HER2 gena mögnun og alhliða erfðafræðilegar breytingar nauðsynlegar til að leiðbeina ónæmismeðferð, markvissu lyfjavali og mati á horfum. Í slíkum mikilvægum klínískum aðstæðum verður ófullnægjandi æxlisvefsrúmmál lykilflöskuháls sem takmarkar nákvæma sameindagreiningu.

Til að bregðast við þessari klínísku eftirspurn hafa alþjóðlegar viðmiðunarreglur um krabbameinsfræði og meinafræðilegar greiningar skýrt mælt með því að nota 14G eða 13G stórar-kjarna nálar fyrir vefjasýni þegar grunur leikur á um illkynja sár eða síðari sameindaundirgerð. Umfram nægilegt rúmmál styðja 14G stórvefjakjarnar handvirka stóra-greiningu undir smásjá, sem gerir meinafræðingum kleift að einangra lífvænleg æxlisrík svæði- með vali og útiloka drepvef, blóðtappa og eðlilega stomahluta. Þessi markvissa auðgun bætir verulega hreinleika æxlis DNA, dregur úr bakgrunnstruflunum og eykur verulega næmni og nákvæmni sameindagreininga. Frá sameindagreiningarsjónarmiði virkar vefjasýnisnálin sem nákvæm líffræðileg leið til að fá „sameindalíffræðilegt vegabréf æxlisins“. Málarhalli þess skilgreinir beint neðri mörk sýnisgæða, ákvarðar árangur erfðafræðilegra prófana og stjórnar að lokum nákvæmni persónulegrar nákvæmrar krabbameinsmeðferðar.